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蛋白樣品制備中，在細(xì)胞破碎之后，既可以利用特定蛋白質(zhì)的特性來(lái)分離某一類蛋白質(zhì)，比如親和純化，比如前面介紹的磷酸化蛋白富集，或者膜蛋白富集；另外一個(gè)考慮方向是去除雜質(zhì)----去掉樣品中某些非目標(biāo)高豐度蛋白或者雜質(zhì)的干擾，同樣可以達(dá)到簡(jiǎn)化樣本的目的。當(dāng)然要小心“倒洗腳水的時(shí)候別把嬰兒也倒掉了”，一定要選...

蛋白質(zhì)是成分高度復(fù)雜的，復(fù)雜的生物大分子包括1個(gè)或多個(gè)長(zhǎng)鏈氨基酸.蛋白或肽折疊形成二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)，和其他蛋白亞基相互作用來(lái)形成四級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白是在結(jié)構(gòu)上彼此不同的同時(shí)出于穩(wěn)定性和活性的目的要求不同的周邊環(huán)境.蛋白當(dāng)脫離他們天然的環(huán)境后是非常容易降解，變性和沉淀的。在蛋白抽提過(guò)程中，細(xì)胞和細(xì)胞器膜是被破...

當(dāng)細(xì)胞破碎的時(shí)候，蛋白水解酶就會(huì)被釋放出來(lái)或被激活，使電泳結(jié)果復(fù)雜化，影響最終結(jié)果分析。為了避免這些情況的出現(xiàn)，建議在樣品制備時(shí)盡可能在低溫下進(jìn)行。此外，許多蛋白酶在PH9以上就失活了，因此Tris堿，碳酸鈉或堿性載體兩性電解質(zhì)往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述條件下仍然保持著活性，此時(shí)應(yīng)當(dāng)使...

蛋白樣品制備是許多實(shí)驗(yàn)重要的第一步，蛋白樣品由于其結(jié)構(gòu)特性各異，又必須使其*溶解和盡可能少的化學(xué)修飾，所以不可能有一個(gè)通用的技術(shù)，只能通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)來(lái)積累經(jīng)驗(yàn)。正如開(kāi)篇所引用的兩句話中包含的深意：在研究蛋白的過(guò)程中，既需要嚴(yán)謹(jǐn)?shù)募夹g(shù)流程，規(guī)范的操作手段來(lái)確保蛋白研究的完整性，也需要將其看成是*而奇妙...

蛋白樣本制備的目標(biāo)簡(jiǎn)言之“三高”，保留活性高，回收產(chǎn)量高，工作效率高。“三高”是苦中作樂(lè)的說(shuō)法，說(shuō)的輕松，這頭一條“保留活性高”便是蛋白樣品制備的痛中之痛----樣品制備過(guò)程導(dǎo)致的蛋白變性和隨后的復(fù)性工作是很令人頭痛的問(wèn)題。這些年來(lái)以GBiosciences為代表的以蛋白質(zhì)研究為核心研發(fā)的公司開(kāi)發(fā)了...

G-biosciences公司位于美國(guó)圣路易斯州。該公司以生產(chǎn)核酸與分子生物學(xué)產(chǎn)品起家。隨著蛋白組學(xué)和功能基因組學(xué)時(shí)代的到來(lái)，該公司將開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)轉(zhuǎn)向蛋白質(zhì)組學(xué)研究，現(xiàn)已形成了整套的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品路線，并且形成了新的子品牌G-biosciences。目前G-biosciences有10萬(wàn)種產(chǎn)品，且主要...